老师
各位同学大家好,今天我们来学习生物选修三专题,基因工程的第二季,基因工程的基本操作程序。前面我们已经学习了目的基因的获取、基因表达载体的构建。今天我们来学习将目的基因导入受体细胞。本节课的学习目标与任务是,一、说出转化的概念。二、简述将目的基因导入不同受体细胞的原理和方法。三、说出筛选含有重组指粒的目的菌的方法。其实在我们学习基因工程之前,我们已经了解了转化这个概念,同学们想一想我们在哪里学过?在 b q 2 格里菲斯的肺炎双球菌转化实验当中,我们了解到加热致死的 s 型细菌,还有某种促进 r 型活细菌转化为 s 型活细菌的活性物质,那当时我们把这种物质就命名为转化因子,这个过程其实就是转化。今天我们来给转化下一个定义,就是将目的基因导入受体细胞,并在受体细胞内稳定维持并表达的过程,就称为转化。同学们可以暂停记一下笔记。
老师
由于我们将目的基因导入受体细胞不同,所以转化的方法也不相同。今天我们来学习将目的基因导入植物细胞的方法、导入动物细胞的方法以及导入微生物细胞的方法。同学们先观察一下右面这幅图,这是一棵柳树,我想同学可能会大吃一惊,对吧?他好像跟我们日常看到的柳树并不太一样,那这棵柳树的表面有很多凸起的瘤,这是怎么回事儿?其实这个柳树感染了农杆菌,因此产生了怪婴瘤。其实农杆菌是普遍存在于土壤中的一种葛兰氏阴性细菌,它能在自然的条件下虚化性的感染绝大多数双子叶植物的受伤部位,并且诱导其产生灌婴瘤。在观音瘤的细胞的染色体当中,有来自农杆菌的 DNA 片段TDNA,那右面这幅图其实就是,农杆菌的 t i 指令,那上面有一段能够转移的 DNA 片段,我们就称为TDNA。而 TDA 可以整合到植物细胞核的染色体当中,能够稳定存在那并随着植物肿瘤细胞的分裂而复制它一些细,它所携带的一些基因。那 TDA 在植物细胞当中也控制着肿瘤的表现,比如参与宿主细胞合成植物激素、银多乙酸,还有一些细胞分裂素等。那因此农杆菌其实是一种天然的植物遗传转化体系。
老师
利用这一点,人们将目的基因插入经过改造的TDNH,那再通过农杆菌转化的作用,就可以使目的肌肉基因进入植物细胞,并将其插入到植物细胞中染色体的 DNA 上,再通过植物组织培养等技术再生出转基之珠,而这样使目的基因的遗传特性得以维持或表达。而由于这种方法比较经济有效,迄今为止,约 80% 的转基植物都是通过这种方法获得查看隐藏内容