2 基因工程的基本操作程序_第4课时逐字稿 高中 · 生物学 · 人教版 · 选择性必修3 生物技术与工程

admin272024-01-04 15:51:23

老师

各位同学大家好,今天我们来学习生物选修三专题。一、基因工程的第二节基因工程的基本操作程序。四、前面我们已经学习了目的基因的获取、基因表达载体的构建,将目的基因导入受体细胞。今天我们来学习目的基因的检测与鉴定。本节课的学习目标与任务是,一、说出目的基因的检测与鉴定方法。阐述分子碳针的工作原理。我们希望目的基因能在受体当中稳定的维持和表达,使受体获得新的遗传特性。由于基因控制生物的性状,所以我们检测的时候不仅仅要检测目的基因是否导入了受体细胞,我们还需要检测基因的转录和翻译是否正常,以及转基后的个体是否具有了新的遗传特性。因此我们要从 4 个水平进行检测与鉴定, DNA 水平、 r n 水平、蛋白质水平以及个体水平。

老师

首先我们要检测转基生物的 DNA 上是否插入了目的基因,也就是说 DNA 水平上的检测,那我们要检测的对象就是目的基因。我们可以用什么样的方法进行检测?我们利用金探针进行 DNA 分子杂交,金探针就是带有标记的目的基因片段,这个标记可以是放射性同位素标记,也可以是荧光分子的标记。

老师

大家观察下面这个图片,大致原理就是将样品 DNA 进行加热,使之形成单量的DNA,带有分子标记的 DNA 探针可与样品进行碱基互补。配对好,同学们可以暂停一下,记一下笔记。同学们可以观察下面的两张图片,思考 DNA 分子杂交技术的流程。首先将受体生物 DNA 提取出来,经过适当的煤切后走琼芷糖凝胶垫用,将不同大小的片段分离开,然后将凝胶上的 DNA 转移到硝酸纤维素膜上,用标记了放射性同位素的 DNA 片段作为探针,与硝酸纤维素膜上的 DNA 进行杂交。如果这两个单链具有互补的碱基序列,那么互补的碱基序列就会结合在一起,形成杂合的双脸区。在没有互补的碱基序列的位置,仍然是两条有理的单量。最后将 x 光底片压在硝酸纤维素膜上,在暗处使底片感光,将 x 光底片冲洗。如果在底片上出现了杂交带,则表明受体染色体 DNA 上确实有目的基因,那这就是 DNA 水平上的检测。这个检测方法我们叫做 thousand blot。我们想要检测目的基因是否转录出MRA,同学们思考一下可以用什么样的方法。

老师

观察下面的流程图可知,检测的方法与检测 DNA 的方法大体相同,利用的是分子杂交,用探针和转基生物的 MRA 进行杂交。如果出现杂交带,则表明目的基因转录出了MRA。这

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